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基因合成

基因合成服务用于提交 DNA 或氨基酸序列,并配置表达宿主、密码子优化、载体、酶切位点和交付要求。页面采用分步确认流程,填写信息后还需要核对订单、进入报价并最终提交。

本页使用一条 66 bp 的公开演示 DNA 序列展示操作。

进入基因合成表单

  1. 登录后从智能体工作台左侧进入湿实验服务
  2. 找到“基因合成”。
  3. 选择“立即下单”。

页面顶部显示四个阶段:

服务选择 → 基因合成信息填写 → 信息确认 → 报价与提交

基因合成下单阶段和序列构建

在完成“确认信息,进入报价”和最终提交前,表单不代表正式订单已经开始执行。

开始前准备

信息 需要确认的内容
序列类型 DNA 序列或氨基酸序列
目标序列 方向、名称、长度、版本及字符是否合法
表达宿主 当前表单提供大肠杆菌和毕赤酵母等选项
密码子优化 是否需要根据表达宿主优化
载体 标准载体或自定义载体,是否已有存档
标签和抗性 是否符合后续表达与筛选要求
酶切方案 两端位点、保护序列及内部规避位点
交付要求 交付内容、合成管数和特殊备注

正式填写前,应确认序列来源和使用权限。不要使用本页演示序列创建真实生产订单。

填写序列构建信息

选择序列类型和表达宿主

  1. 在“序列类型”中选择“DNA 序列”或“氨基酸序列”。
  2. 在“表达宿主”中选择后续计划使用的宿主。
  3. 根据序列类型和表达方案决定是否启用密码子优化。

页面提示氨基酸序列建议开启密码子优化,但是否启用仍应结合宿主、载体和实验方案确认。

添加目标序列

页面提供以下方式:

  • 导入 FASTA/TXT:从本地文件导入一条或多条序列。
  • 直接粘贴:支持 FASTA 或单条裸序列。
  • 新增一条:手动增加序列卡片。
  • 复制全部:复制当前全部序列。
  • 清空全部序列:移除当前序列,操作前应确认已保留原始数据。

多条 FASTA 使用 > 后的文本作为序列名称。导入后逐条核对名称、内容和长度,不要只检查页面显示的总条数与总长度。

每条序列应使用唯一、容易识别的名称。页面显示“序列校验通过”后,仍应人工检查方向、起止位置、终止密码子和预期阅读框。

查看序列和蛋白翻译

在序列卡片中选择“查看序列 & 蛋白翻译”,可以打开序列详情。

查看序列与蛋白翻译

详情页当前提供:

  • DNA 序列名称和长度。
  • +1+2+3-1-2-3 阅读框。
  • 蛋白翻译的显示或隐藏。
  • 编码区列表和氨基酸长度。
  • 终止密码子提示。
  • 编辑和复制操作。
  • 完整序列查看。

演示序列在 +1 阅读框中翻译为 22 aa,并包含一个终止密码子。正式序列应根据预期编码区核对阅读框和终止位置;页面翻译结果不能替代原始序列复核。

配置载体、标签和抗性

完成序列后,在“载体信息”中选择标准载体或自定义载体。

载体信息配置

需要核对:

  • 载体类型和载体名称。
  • 标签类型及所在端,例如 C 端 6×His
  • 载体抗性。
  • 平台是否已存档该载体。
  • 自定义载体是否需要上传图谱。

标准载体页面可能自动带出标签、抗性和存档状态。自动填充仅用于减少录入,不能替代正式载体资料核对。

选择自定义载体时,应按页面要求填写名称并提供必要图谱。载体、标签、抗性、表达宿主和后续纯化方案需要相互匹配。

设置酶切位点与侧翼序列

页面分别提供 5' 端和 3' 端配置:

  1. 选择酶切位点;不需要时保持“未选择”或“不使用酶切位点”。
  2. 选择位点后检查系统自动填入的侧翼保护序列。
  3. 检查“内部规避酶切位点(排除池)”。
  4. 根据构建方案手动追加其他需要规避的位点。

酶切位点、排除池和交付内容

页面会将末端酶切位点自动加入排除池。选择位点前仍应检查:

  • 载体多克隆位点和构建方向。
  • 目标序列内部是否包含相同位点。
  • 阅读框是否连续。
  • 标签和起止密码子是否符合设计。
  • 两端保护序列是否满足实际酶切要求。

不确定酶切方案时,不要为了通过表单随意选择位点,应暂停填写并联系平台确认。

设置交付要求

当前演示选择的标准交付内容为 2 μg 质粒 + 甘油菌,合成管数为 1。正式订单应以页面当前选项和后续报价为准。

特殊备注可以补充:

  • 同源重组构建要求。
  • 表达宿主选择。
  • 标签或 TEV 位点要求。
  • 图谱、质控和交付条件。
  • 页面标准字段无法表达的其他限制。

关键要求不能只写在附件名中,应同时填写到表单或备注,并在信息确认阶段再次检查。

草稿和表单操作

页面底部提供“草稿/模板”和“一键清空”等操作,并可能自动恢复上次填写的草稿。

基因合成草稿与表单操作

  • 继续旧草稿前,检查序列、载体和交付要求是否仍属于当前任务。
  • 使用模板后,重新核对所有自动填充字段。
  • “一键清空”会移除当前填写内容,操作前保留原始序列和必要配置。
  • 页面显示“草稿未保存”时,不要假设刷新或离开后一定能恢复全部修改。

进入信息确认

填写完成后,选择“下一步:信息确认”。页面会汇总当前订单信息。

基因合成信息确认页面

选择“返回修改”可以回到表单;选择“确认信息,进入报价”会进入下一阶段。

进入报价前逐项检查:

  • 序列名称、内容、长度、方向和版本。
  • 表达宿主与密码子优化设置。
  • 载体、标签、抗性和图谱。
  • 两端酶切位点、保护序列和排除池。
  • 交付内容、合成管数和特殊备注。

报价与提交

基因合成报价与提交

确认按钮的含义

“下一步:信息确认”只进入核对页面;“确认信息,进入报价”会进入报价阶段;最终提交可能产生真实业务记录。每一步都应检查当前页面说明,不要连续点击跳过核对。

表单问题排查

情况 检查方法
序列校验失败 检查序列类型、非法字符、FASTA 标题和空记录
翻译结果不符合预期 检查方向、阅读框、起止密码子和序列是否完整
无法进入信息确认 查找带 * 的必填字段,并确认所有序列校验通过
载体信息不一致 重新选择载体,核对标签、抗性、存档和图谱状态
酶切方案冲突 检查目标序列内部位点、末端位点和排除池
草稿内容不是当前任务 返回表单逐项核对,必要时清空后重新填写
不确定标准服务能否满足 暂停提交,使用其他定制服务或联系平台确认

订单创建后的状态查看方式参阅订单流程与状态