蛋白表达

蛋白表达服务用于从已有基因合成订单继续配置表达体系、载体和诱导条件，并提交小试表达与鉴定需求。当前线上页面不提供无来源订单的直接填写入口。

进入蛋白表达服务

1. 登录后从智能体工作台左侧进入湿实验服务。
2. 找到“蛋白表达”。
3. 检查“从基因合成续下单”按钮是否可用。

当前账户没有符合条件的订单时，按钮处于禁用状态，页面提示：

需先完成基因合成

这表示蛋白表达需求需要与平台中的基因合成订单建立上游关系，不能通过空白表单直接创建。

来源订单要求

开始续下单前，检查基因合成订单：

• 属于当前账户或当前组织。
• 已达到页面允许继续蛋白表达的状态。
• 目标序列、载体和表达宿主与本次任务一致。
• 订单中的构建体和标签信息已经确认。
• 上游材料和交付形式能够支持表达实验。

没有可用订单时，应先完成基因合成。不要为了启用蛋白表达入口创建不真实的基因合成订单。

选择来源订单

来源订单满足条件后：

1. 在湿实验服务首页选择“从基因合成续下单”。
2. 在来源订单列表中查找目标订单。
3. 核对订单编号、目标序列、载体、宿主和状态。
4. 选择正确订单，进入蛋白表达信息填写。

名称相似的订单可能对应不同序列版本、标签或载体，不能只按创建时间选择。

开始前准备

信息	需要准备的内容
来源订单	基因合成订单编号、状态和交付内容
目标序列	DNA 或氨基酸序列、名称和版本
表达体系	宿主、载体、抗性和标签
表达规模	小试体积或页面要求的培养体积
诱导条件	温度、诱导剂、浓度及其他条件
检测要求	表达量、可溶性、分子量或其他鉴定项目
交付要求	样品形式、数量、保存和运输条件
特殊限制	分泌表达、低温、避光或不可使用的处理方式

表达效果受序列、宿主、载体、诱导和样品处理等多项因素影响。提交需求前应明确实验目标和可接受的评价标准。

确认来源序列

选择基因合成订单后，页面会同步或带出对应序列和构建信息。

检查来源订单是否正确，来源订单自动带出的信息仍需人工复核。发现问题时返回上游订单确认，不要在后续备注中简单覆盖错误序列。

理解阅读框和编码区

DNA 双链共有六种可能的阅读方式。正向链有 +1、+2、+3 三个阅读框，反向互补链有 -1、-2、-3 三个阅读框。数字表示从该方向的第几个碱基开始，按每三个碱基一个密码子进行翻译。

选择阅读框只会切换当前查看和筛选编码区的方式，不会修改来源订单中的 DNA。如果来源构建明确为正向、从第一个碱基起始的完整 CDS，通常优先核对 +1，但最终选择仍须与原始序列设计文件一致。

配置表达体系

根据页面提供的选项配置：

选择表达体系时，应考虑：

• 蛋白是否需要复杂折叠或翻译后修饰。
• 是否包含二硫键、跨膜区域或信号肽。
• 标签是否便于后续鉴定和纯化。
• 载体、抗性和宿主是否兼容。
• 上游基因是否针对该宿主完成密码子优化。

不要把页面默认选项视为平台对当前蛋白的方案推荐。

设置表达规模和诱导条件

页面可用字段应以当前来源订单和表达体系为准。

不同表达系统使用的培养和诱导条件不同。切换宿主后，应重新检查所有字段，不要沿用另一表达体系的温度、诱导剂或浓度。

已有实验经验时，在备注中说明：

• 已测试的宿主、载体和标签。
• 表达温度、诱导条件和培养规模。
• 总表达、可溶表达或包涵体情况。
• 已知降解、聚集或毒性问题。
• 希望平台避免重复的失败条件。

进入信息确认

完成全部必填项后，选择页面提供的下一步按钮，进入信息确认。

确认时检查：

• 来源订单和目标序列是否对应。
• 宿主、载体、抗性和标签是否匹配。
• 表达体积、温度、诱导剂和浓度是否完整。
• 鉴定方法和成功判定标准是否明确。
• 交付内容、保存条件和特殊备注是否正确。
• 后续纯化需要的信息是否已经体现。

发现问题时返回修改，不要进入报价。

报价与提交

表达体系、培养规模、检测项目和特殊处理都会影响报价及周期。实际服务范围、价格和交付时间以最终报价及双方确认为准。

提交不构成表达成功承诺

蛋白是否能够获得目标表达量和可溶性受序列、构建体、宿主及实验条件影响。订单提交和页面默认参数不等同于效果保证，验收方式应在报价确认前明确。

无可用来源订单时

如果按钮不可用：

1. 检查当前账户是否具有已完成的基因合成订单。
2. 在历史订单中确认上游订单状态。
3. 确认订单属于当前账户或组织。
4. 先完成基因合成，再返回蛋白表达入口。
5. 已有外部构建体或无法从平台订单续单时，使用其他定制服务或联系平台确认。

表单问题排查

情况	检查方法
“从基因合成续下单”不可用	检查是否存在符合状态要求的基因合成订单
来源订单列表为空	检查账户、组织和基因合成订单状态
同步的序列或载体不正确	返回来源订单核对版本、载体、标签和宿主
表达体系难以选择	提供蛋白性质、已有经验和后续用途，联系平台确认
诱导条件不适用于当前宿主	切换表达体系后重新检查全部培养和诱导字段
无法进入信息确认	检查所有必填项、数值单位和来源订单关联
需要使用外部已有构建体	使用其他定制服务或联系平台确认接收方式

表达订单创建后的状态和进度参阅订单流程与状态。